DNA杂交技术和PCR区别

DNA杂交技术和PCR区别

随着PCR技术的广泛应用,人们对生命本质的研究也因此而日渐深入,这项科技毫无疑问成为上个世纪的重大发明之一。PCR技术能在体外迅速、大量且灵敏地扩增目的基因片段。然而仅有这些基因片段还远远不够,更需要一种高效的基因加工手段——基因拼接技术对其进行灵活改造。无论是基因改造、载体改造还是未来可能出现的物种改造等涉及DNA操作的实验,都会广泛使用到基因拼接技术。

针对基因拼接的难题,先后出现了SOE法(通过复制时DNA链的交错延伸实现基因拼接)和SDL方法(直接拼接法)。但现有的基因拼接技术虽能完成拼接任务,仍存在许多问题和挑战。例如外源片段的引入、基因移码突变、操作繁琐且成功率低等问题,而且通常一个反应只能完成两个片段的拼接。

为了应对这些问题,武汉云克隆经过七年多的研发,成功推出了一种高效多基因拼接技术及相关技术体系。这一技术在核酸酶及其反应体系上进行了创新,突破了传统拼接技术的限制。它的优势在于:

1. 能在同一反应体系中同时完成3-5个基因片段的拼接,大大提高了效率。

2. 适用于不同长度的拼接片段,无论是200bp还是8000bp的片段都能轻松应对。

3. 拼接成功率高,普通两两拼接成功率达到85%以上。

4. 避免了外源序列的引入。

该技术的核心特点在于其特殊的核酸酶,这种酶能够非特异性地识别DNA的5’-3’端的14-20bp碱基序列。在反应过程中,它沿着5’-3’方向进行消化,使DNA形成粘性末端。在适当条件下,这些粘性末端通过碱基互补配对连接成一个完整的整体。如图所展示的那样,这一技术为基因拼接领域带来了性的突破。


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